上次有讀者給小編留言，說自己的實驗室想買一臺qPCR儀，由于價格不菲，就怕買錯了對以后的實驗和經(jīng)費都帶來麻煩。這里小編要說一句，好的產(chǎn)品越用越順心，差的產(chǎn)品越用越糟心。那么今天小編就和大家介紹一下一臺出色的qPCR儀需要具備哪些特點呢。 無論是選擇國產(chǎn)還是進口的qPCR儀，首先要從儀器光學檢測的技術方案來著手，因為這是qPCR 儀的核心技術，它決定了實驗的準確性、可靠性和重復性。
一、采用頂部檢測CCD技術
目前來看，頂部檢測CCD技術是定量PCR儀的蕞佳技術方案。國內(nèi)頂尖qPCR儀和國外主流qPCR儀都采用這種技術，比如美國Thermofisher的Q5/7500，ROCHE的LC480/96，BIORAD的CFX96，以及德國JENA的qTOWER，國內(nèi)有朗基的Q1000/Q2000系列產(chǎn)品。這種頂部檢測技術采用相機原理，直接從PCR管的上方對樣品進行實時檢測，采光面平行性好，采光面積大，因此小體積反應液都能放心使用（如圖1）。
眾所周知，采用頂部檢測技術的 qPCR儀所需要的反應體積只需5-10ul即可，（而其他檢測方案的qPCR儀至少需要20ul以上），從而很大程度地降低了實驗成本。實驗達人們蕞清楚qPCR試劑有多貴了，能省一半的試劑就是省下大把的銀子啊
。
圖1 10ul，2倍稀釋4個重復
在Q2000上獲得的結(jié)果
二、能用0.1ml白管
這里小編要告訴你一個獲得蕞佳結(jié)果的訣竅——就是改變習慣，使用白管。因為不透明的白管能屏蔽背景噪音，即使樣品井有點臟都沒有關系。另外，白管還能減少光的折射損失，信噪比和靈敏度更高，因此可獲得比透明管更佳的實驗效果。頂部檢測CCD方案絕配白管，可實現(xiàn)1+1>2的優(yōu)勢。
圖2 qPCR專用0.1白管
另外，0.1ml管由于光程比0.2ml管更短，因而熒光信號更穩(wěn)定，靈敏度更高（可點擊查看：干貨 | 為什么qPCR高手都愛用0.1ml管？）。國內(nèi)PCR儀朗基科儀就是采用SSLP短光程靜態(tài)熒光CCD成像技術，巧妙地將頂部檢測的光程縮小到100mm（而羅氏LC480的光程達到800mm），既可使用白管，又適用0.1ml管。這項創(chuàng)新技術使得朗基Q2000型96孔熒光定量PCR儀的體積更是做到了進口同類產(chǎn)品的一半甚至更小，大大節(jié)約了實驗室空間。
圖3 朗基Q1000 & Q2000熒光定量PCR儀
三、升降溫速率越快越好
無論是普通pcr儀還是熒光定量pcr儀，升降溫速率都決定了實驗所需的時間，當然是越快越好咯。能快速達到目標溫度，從而縮短實驗時間和提高工作效率肯定是一臺優(yōu)秀的qPCR儀應具備的品質(zhì)。而對于PCR儀的變溫速率來說，每秒增加1度都是半導體技術的一次飛躍。
四、通量越大越好
儀器的通量，包括孔數(shù)和通道數(shù)。目前市場上有8孔、16孔、48孔、96孔，還有384孔，通道數(shù)有二通道、四通道、五通道和六通道可以選擇。那我們應該怎么選呢？！
買產(chǎn)品并不只為當下需要，更多的要考慮未來，當然是孔數(shù)越多越好，通道數(shù)越多越好。無論是科學研究還是疾病診斷，都會越來越多地使用高通量熒光定量PCR儀。需要注意的是，有些進口廠家的儀器只對自家生產(chǎn)的多通道染料開放，所以有較大的局限性，選擇時需謹慎。
五、軟件功能越多越好
要說硬件是骨，軟件就是血肉靈魂。出色的軟件不僅賦予儀器齊全的功能、簡便的操作，還能帶來美好的客戶體驗和完善的實驗結(jié)果。相對定量、絕對定量、熔解曲線、基因分型（SNPs）和陰陽性判定這些都是qPCR軟件必不可少的功能，如果有HRM和統(tǒng)計學分析模式功能那就更完美了。
在了解完這幾點之后，小伙伴們應該心中自有一本譜了吧？小編希望各位都能買到一臺稱心如意的qPCR儀。
